技術(shù)文章
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RNA的保護(hù)
2010-01-26RNA的保護(hù)與DNA提取實(shí)驗(yàn)相比，RNA的提取實(shí)驗(yàn)常常較為困難，這主要是由于RNA非常容易降解。而造成RNA降解的原因來(lái)自內(nèi)因和外因兩個(gè)方面。內(nèi)因：RNA核糖殘基的2’和3’位置帶有羥基，易被水解；外因：生物體內(nèi)和外部環(huán)境中存在大量RNase，并且RNase不易失活，高溫后仍然能夠正確折疊恢復(fù)活性。因此，從樣品的儲(chǔ)存、RNA的提取以及RNA提取完成后的保存，...
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細(xì)胞從培養(yǎng)皿上的解離
2010-01-18細(xì)胞從培養(yǎng)皿上的解離以下通用步驟可以在保持細(xì)胞完整性的同時(shí)從培養(yǎng)器皿中分離多種細(xì)胞系。但這一步驟不能廣泛適用于所有細(xì)胞系。應(yīng)通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定不同體系所需的佳條件和濃度。?在傳代培養(yǎng)時(shí)監(jiān)測(cè)細(xì)胞存活率。?細(xì)胞存活率應(yīng)大于90%。?對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基，建議降低胰酶用量。1．去除器皿中原有細(xì)胞培養(yǎng)基。2．用不含鈣鎂的平衡鹽溶液或EDTA清洗細(xì)胞。將清洗溶液加到培養(yǎng)瓶中與...
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原代組織細(xì)胞的解離
2010-01-18原代組織細(xì)胞的解離從原代組織上獲取單個(gè)細(xì)胞懸液的常用方法是利用酶的解聚作用。盡量縮短用酶處理細(xì)胞的時(shí)間，以獲得高的存活率。按下面的方法解聚整個(gè)組織，以獲得大量細(xì)胞。胰酶1．先去除無(wú)關(guān)組織，然后用滅菌的解剖刀或剪刀將組織切成3-4mm大小碎塊。通過(guò)在不含鈣鎂的平衡鹽溶液進(jìn)行重懸來(lái)清洗組織碎塊。待組織碎塊沉降后去掉上清液。重復(fù)清洗2-3次。2．將裝有組織碎塊的容...
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深低溫保藏細(xì)胞的解凍
2010-01-18深低溫保藏細(xì)胞的解凍深低溫保藏的細(xì)胞十分脆弱，要輕柔操作。快速解凍深低溫保藏的細(xì)胞，然后直接將其接種到*生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，如果細(xì)胞對(duì)抗凍劑（DMSO或甘油）特別敏感，則離心除去抗凍劑，然后將細(xì)胞接種到*生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。下面是深低溫保藏細(xì)胞的建議解凍步驟：直接接種法1．從凍存管中取出細(xì)胞，用37℃水浴快速解凍。2．將細(xì)胞直接接種到*生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。每毫升凍存細(xì)胞需要1...
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使用抗生素和抗真菌素進(jìn)行去污培養(yǎng)
2010-01-18使用抗生素和抗真菌素進(jìn)行去污培養(yǎng)當(dāng)不可替代的培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生污染時(shí)，研究人員可以嘗試消除或控制污染。首先，確定污染類型是細(xì)菌、真菌、支原體還是酵母。將污染的培養(yǎng)物與其他細(xì)胞系隔離。實(shí)驗(yàn)用消毒劑清洗培養(yǎng)箱和層流通風(fēng)櫥，檢查HEPA（粒子空氣）過(guò)濾器。高濃度的抗生素和抗真菌素可能對(duì)某些細(xì)胞系有毒害作用。因此，應(yīng)測(cè)定劑效關(guān)系以確定抗生素和抗真菌素的毒性劑量。這一點(diǎn)在使...
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DNA產(chǎn)物純化試劑盒簡(jiǎn)介
2010-01-11DNA產(chǎn)物純化試劑盒簡(jiǎn)介：對(duì)于TA克隆、酶切或者直接測(cè)序等試驗(yàn)來(lái)說(shuō)，純化PCR產(chǎn)物或酶切產(chǎn)物是非常必要的。以TA克隆為例，其成功率跟目的片段的純度高低具有重要關(guān)系。雖然未經(jīng)過(guò)純化的PCR產(chǎn)物也可以跟載體連接，但會(huì)增加篩選陽(yáng)性克隆的難度，因?yàn)镻CR產(chǎn)物中的dNTP和引物等可能也會(huì)跟載體連接。在進(jìn)行連接試驗(yàn)時(shí)，這些非特異性的產(chǎn)物會(huì)跟特異性產(chǎn)物相互競(jìng)爭(zhēng)，從而導(dǎo)致連...
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質(zhì)粒提取試劑盒簡(jiǎn)介
2010-01-11質(zhì)粒提取試劑盒簡(jiǎn)介：質(zhì)粒（Plasmid）是一種染色體外的穩(wěn)定遺傳因子，大小從1-200kb不等，為雙鏈、閉環(huán)的DNA分子，并以超螺旋狀態(tài)存在于宿主細(xì)胞中。質(zhì)粒主要存在于細(xì)菌、放線菌和真菌細(xì)胞中，它具有自主復(fù)制和轉(zhuǎn)錄能力，能在子代細(xì)胞中保持恒定的拷貝數(shù)，并表達(dá)所攜帶的遺傳信息。質(zhì)粒提取原理及流程：較常用的質(zhì)粒DNA提取方法有3種：堿裂解法、煮沸法和去污劑（如...
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基因組DNA提取試劑盒簡(jiǎn)介
2010-01-11基因組DNA提取試劑盒簡(jiǎn)介：DNA是遺傳信息的載體，是重要的生物信息分子，是分子生物學(xué)研究的主要對(duì)象，為了進(jìn)行測(cè)序、雜交、基因表達(dá)、文庫(kù)構(gòu)建等試驗(yàn)，獲得高分子量和高純度的基因組DNA是非常重要的前提，因此基因組DNA的提取也是分子生物學(xué)試驗(yàn)技術(shù)中重要、基本的操作之一。Solarbio公司提供各種不同樣品基因組DNA提取試劑盒，如植物、動(dòng)物、細(xì)菌、細(xì)胞、血液、...
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TNFα免疫組化染色試劑盒
2010-01-04系列SABC試劑盒使用說(shuō)明書(shū)TNFα免疫組化染色試劑盒產(chǎn)品編號(hào)：SA2041保存：4℃冷藏有效期：一年工作原理：TNFα是腫瘤壞死因子α抗原，該蛋白和誘導(dǎo)細(xì)胞的快速死亡有關(guān)?？贵w：兔抗TNFα抗原，親和純化抗體。適宜種屬：人、大鼠、小鼠組織。標(biāo)本處理：細(xì)胞涂片，冰凍和石蠟切片。染色模式：細(xì)胞漿。試劑盒內(nèi)容：1．5％BSA封閉液2ml或5ml，組織切片的封閉。...
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活性氧檢測(cè)試劑盒
2010-01-04活性氧檢測(cè)試劑盒一．產(chǎn)品簡(jiǎn)介：活性氧檢測(cè)試劑盒（Reactiveoxygenspeciesassaykit）是一種利用熒光探針DCFH-DA進(jìn)行活性氧檢測(cè)的試劑盒。DCFH-DA本身沒(méi)有熒光，可以自由穿過(guò)細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后，可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細(xì)胞膜，從而使探針很容易被裝載到細(xì)胞內(nèi)。細(xì)胞內(nèi)的活性氧可以氧化無(wú)熒光的DCFH生...
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細(xì)胞凋亡熒光Hoechst 33342 /PI 雙染試劑盒
2010-01-04細(xì)胞凋亡熒光Hoechst33342/PI雙染試劑盒一、原理熒光染料Hoechst33342能少許進(jìn)入正常細(xì)胞膜，使其染上低藍(lán)色，而凋亡細(xì)胞的膜通透性增強(qiáng)，因此進(jìn)入凋亡細(xì)胞中的Hoechst33342比正常細(xì)胞的多，熒光強(qiáng)度要比正常細(xì)胞中要高，此外，凋亡細(xì)胞的染色體DNA的結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變從而使該染料能更有效地與DNA結(jié)合，并且凋亡細(xì)胞膜上的p-糖蛋白泵功能受...
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IgM捕捉ELISA法
2009-12-30IgM捕捉ELISA法（MacELISA）檢測(cè)出血熱IgM抗體本試劑盒系采用抗人μ鏈捕獲人血清IgM抗體，加辣根過(guò)氧化物酶－病毒抗原標(biāo)記物，用以檢測(cè)出血熱特異性IgM抗體。具有較高的敏感性、特異性和重復(fù)性。特別適用于出血熱的早期特異性診斷及其它實(shí)驗(yàn)性研究。本試劑盒為96人份/包裝。試驗(yàn)材料：（1）抗人IgM抗體（μ鏈）：用pH9.5的包被液包被酶標(biāo)板（2）凍...
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熒光定量PCR檢測(cè)腺病毒試劑盒
2009-12-30熒光定量PCR檢測(cè)腺病毒試劑盒機(jī)型:ABI7000、Lightcycler等探針：Taqman規(guī)格：50人份/盒概述：腺病毒（Adenovirus）是一群分布十分廣泛的DNA病毒。能引起人類呼吸道、胃腸道、泌尿系及眼的疾病。少數(shù)對(duì)動(dòng)物有致癌作用。腺病毒顆粒直徑60～90nm，沒(méi)有囊膜，20面體立體對(duì)稱，衣殼由252個(gè)克微粒組成，其中240個(gè)殼微粒是六鄰體（H...
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超氧化物檢測(cè)試劑盒
2009-12-30超氧化物檢測(cè)試劑盒規(guī)格：100次產(chǎn)品簡(jiǎn)介：?超氧化物檢測(cè)試劑盒（SuperoxideAssayKit）是一種用于超氧化物快速高靈敏度檢測(cè)的試劑盒。?本試劑盒利用超氧化物可以還原WST-1產(chǎn)生可溶性有色物質(zhì)為基礎(chǔ)來(lái)檢測(cè)超氧化物。本試劑盒的檢測(cè)試劑中添加了Catalase（觸酶）等，可以清除過(guò)氧化氫等過(guò)氧化物對(duì)WST-1顯色的干擾，使測(cè)定結(jié)果更加準(zhǔn)確。并且本試劑...
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人甲肝病毒抗體IgG ELISA 檢測(cè)試劑盒
2009-12-23人甲肝病毒抗體IgG（HAV-IgG）ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿試驗(yàn)原理：HAV-IgG試劑盒是間接法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知HAV-IgG濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將HAV-IgG和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加...